Electrofocusarea sau focalizarea izoelectrica




Avem o eprubeta in care avem un pol pozitiv, un pol negaiv, dar care este plina cu un gel (nu este solutie) care are un anumit gradient de PH.

PH-ul variaza de la extremitatea superioara, unde este PH=9, la extremitatea inferioara unde este PH=3.


Ce vom face?


Acest gradient de PH este stabil.

In aceasta eprubeta vom pune cu o pipeta, proba ser de la pacient si conectam la o diferenta de potential.


Proteinele vor incepe sa migreze in lungul acestui gradient de PH, pana cand vor atinge PH-ul izoelectric. Adica vor avea o incarcare electrochimica zero.


Este momentul in care suma sarcinilor pozitive este egala cu suma sarcinilor negative, prin urmare proteina nemaiavand sarcini electrice, nu mai poate sa raspunda la campul electric in care este plasata.


Si atunci, nemaiavand sarcina electrica se va opri din migrare. In functie de PH-ul pe care il atinge, putem afla ce tip de proteina a migrat.


Aceasta se numeste electrofocusare sau focalizare izoelectrica.

Deci, separarea proteinelor intr-un gel cu variatie continua a PH-ului, un anumit gradient de PH ( intre 9 si 3 in eprubeta). Este vorba despre un gel, ceea ce insemana ca impiedica difuzia libera a serului in toata masa de gel din interiorul eprubetei.


Vom plasa serul sangvin in partea superioara, aplicam apoi diferenta de potential, adica o FORTA ELECTRICA.

Datorita fortei electrice, proteinele capata o incarcare electrica si vor incepe sa migreze catre polul pozitiv.


Electrofocusarea sau focalizarea izoelectrica- Continuare


Unde se va atinge PH-ul izoelectric, inseamna ca numarul sarcinilor electrice pozitive este egal cu numarul sarcinilor negative. Deci proteina, in acel moment, nu mai are o sarcina electrica, care sa permita deplasarea ei in interiorul gelului. Atunci se va opri din migrare si se va depune in functie de PH-ul izoelectric al fiecarei proteine.


Astfel, se realizeaza focalizarea izoelectrica.

© 2020 by Subiecte Medicina

Iasi, Romania

Tel: 0756 840 608

  • White Facebook Icon
  • White Twitter Icon